去甲腎上腺素ELISA試劑盒使用說明書

去甲腎上腺素ELISA試劑盒使用說明書

(上海恒遠生物科技有限公司)

1、應用范圍

此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測。

2、臨床意義

兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用于成神經(jīng)細胞瘤和神經(jīng)節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。

3、實驗原理

此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標準曲線上讀取。

4、貯存與穩(wěn)定性

試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。

5、樣品的采集與儲存

注意	人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMT抑制劑，還有降血壓類藥物。

血漿（EDTA）

注意	血液采集后兩小時內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。
注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質(zhì)。
貯存		2-8℃	≤-20℃	避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。
穩(wěn)定性		6h	1個月

尿液

可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml 6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。
貯存	≤-20℃	避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。
穩(wěn)定性	6個月

6、試劑盒成分

注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分

數(shù)量	標志	成分
1×12×8	MTP	包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克隆）。
1×6×2.5ml	CAL A-F	標準品A-F，即用 腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml (0;8;27;82;273;819nmol/L) 去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL (0;30;89;296;887;2955nmol/L) 多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL (0;78;228;750;2938;14688nmol/L) 內(nèi)含[-]腎上腺素， [-]去甲腎上腺素， [-]多巴胺(有生物活性), 0.1M的HCl
1×2×2.5ml	CONTROL 1+2	質(zhì)控品1+2 即用,含: [-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素， [-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl, 具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.
1×250μL	ENZCONJ CONC	酶聯(lián)物 濃縮型（100×） 內(nèi)含：堿性磷酸酶標記的抗體，Tris緩沖液， HCl，0.01%的NaN3
2×	EXTRPLATE	提取板（微孔板） 每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。
1×60ml	EXTRBUF	提取緩沖液 粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN3
2×1.25ml	COMT LYO	COMT凍干粉 內(nèi)含:兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN3
1×2ml	COMT ADD	COMT添加劑 內(nèi)含:人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。
1×7ml	ANTISERUM DO	去甲腎上腺素抗血清 紫羅蘭色，即用， 內(nèi)含:抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。
2×1.25ml	COENZ	酶聯(lián)復合物 即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。
1×3ml	ENZBUF	酶緩沖液 即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。
1×17ml	RELEASEBUF	Release緩沖液 黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。
1×3ml	ACYLREAG	酰化試劑 即用，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。 注意：有毒，高可燃性。
1×50ml	WASHBUR CONC	洗滌液 濃縮型（10×） 內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN3
1×9×	PNPP SUBS	PNPP底物片 內(nèi)含：對硝基苯磷酸（PNPP）
1×27ml	PNPP BUF	PNPP底物緩沖液 即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN3
1×15ml	PNPP STOP	PNPP終止液 即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA
3×	FOIL	粘性金屬板