恒遠生物|人羊膜細胞(WISH)培養建議

品牌: 恒遠生物

貨號: HYCC10347

中文名稱: 人羊膜細胞；WISH

規格: T25

形態特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 最初以為這株細胞的起源是正常羊膜，但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋法分析，證實該細胞是HeLa細胞污染的；角蛋白陽性。

培養條件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS　

傳代方法: 1：2~1:4傳代，每周2~3次。

凍存條件: 無血清細胞凍存液




一、細胞培養常見問題解答




1.培養基為什么一般都是偏紅色?

因為培養基加了酚紅來顯示顏色，指示pH范圍為6-8，顏色會由黃變為紫紅。這是為了我們能更直觀觀察培養液的變化，如變黃，則代表偏酸，偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說，細胞吸收營養后，變黃后就暗示我們要換培養基啦!所以密切觀察很重要哦!




2.細胞的居住環境

舒適無菌的環境是細胞健康生活的重要基礎。如下圖為培養細胞的器皿，包括形狀、規格、用途多樣的培養瓶、培養皿及培養板。最終住進37℃，5%CO2的恒溫培養箱。




3.細胞培養皿和培養瓶區別?

就細胞培養狀態來說，培養瓶和培養皿沒有太大區別，主要在于安全系數(培養瓶>培養皿)、培養細胞數量(大培養瓶>培養皿)。但是培養瓶成本也會相對較高，因此無特殊要求，一般選擇培養皿即可。




4.為什么細胞復蘇后，很多難以貼壁?

忽略培養基的問題，主要考慮細胞凍存時狀態差或者復蘇時動作太慢導致細胞死亡。切記最重要的融化速度要快，可不時搖動冷凍管，使之盡快通過最易受損的溫度段(-5～0℃)。




5.細胞凍存時對細胞量有要求嗎?

細胞復蘇時會有一定的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，起始濃度106—107個/ml/管。




6.細胞污染怎么辦?

如發現細胞有污染，一般建議丟棄。如果細胞非常寶貴，可試著加入含抗生素的培養基反復清洗，并用抗生素含量高的培養基培養，并經常更換培養基。




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